• Marcela González Cid. Investigador Independiente CONICET.
• Marcelo de Campos Nebel. Investigador Adjunto CONICET.

• Néstor Aznar (Beca doctoral CONICET). Director Dr. de Campos Nebel.
• Camila Gosso (Beca doctoral CONICET). Director Dr. de Campos Nebel.
• Alan Maximiliano Segovia (Estudiante avanzado de Lic. en Genética). Director Dra. González Cid.

La naturaleza de la doble hélice del ADN requiere que constantemente sean removidas barreras topológicas para que se lleven a cabo diversos procesos metabólicos dentro del núcleo, que son necesarios para la vida celular. Las Topoisomerasas (Top) logran esto a través de la interrupción temporal de la integridad del genoma, y el posterior restablecimiento de la continuidad de la doble hebra de ADN. De esta forma las Topoisomerasas forman uniones fosfodiester transitorias con extremos 3’ (Top1) o con extremos 5’ (Top2) de ADN. Varios agentes quimioterapéuticos y ciertas lesiones genómicas aumentan la vida media de estas enzimas unidas al ADN, y generan bloqueos proteicos en los extremos del mismo, lo cual requiere mecanismos especializados de remoción para permitir su reparación. El progreso de las horquillas de replicación del ADN como así también el traspaso de la maquinaria transcripcional, puede verse interrumpido por estos bloqueos proteicos llevando al estancamiento o al colapso de estas estructuras. Esto puede retrasar los procesos mencionados, o incluso resultar en lesiones genómicas nocivas que requieran su reparación para evitar la generación de mutaciones.

La remoción de los bloqueos proteicos de los extremos del ADN requiere tanto de actividades nucleolíticas como hidrolíticas. En el primer caso, se realiza una escisión nucleolítica de un tramo de ADN junto a la proteína bloqueante que conlleva a la eventual pérdida de material genético. Por otra parte, existen hidrolasas celulares (TDP1 y TDP2) capaces de remover enlaces fosfodiester entre las proteínas bloqueantes y el ADN en forma directa. Alteraciones en estos procesos pueden ser responsables de resistencia a terapias oncológicas o incluso condiciones neurodegenerativas.

Las líneas de investigación que se llevan a cabo actualmente en nuestro laboratorio pueden resumirse en las siguientes:

• Identificación de los mecanismos moleculares y celulares responsables de la remoción de complejos de clivaje estabilizados por los venenos de Top2. (Aznar/de Campos Nebel)
• Evaluación del efecto de los estados cromatínicos sobre la actividad reparadora de las Tirosil-ADN-fosfodiesterasas en respuesta a venenos de Top2. (Gosso/de Campos Nebel)
• Análisis del entramado de elementos de respuesta al daño (DDR) que mantienen la integridad del genoma frente al daño generado por los venenos de Top2. (Segovia/González Cid)

• Alternative end-joining originates stable chromosome aberrations induced by etoposide during targeted inhibition of DNA-PKcs in ATM-deficient tumor cells. de Campos Nebel M, Palmitelli M, Pérez Maturo J, González-Cid M. Chromosome Res. 2022 Dec;30(4):459-476. doi: 10.1007/s10577-022-09700-w.
• Measurement of Drug-Stabilized Topoisomerase II Cleavage Complexes by Flow Cytometry. de Campos Nebel M, Palmitelli M, González-Cid M. Curr Protoc Cytom. 2017 Jul 5;81:7.48.1-7.48.8. doi: 10.1002/cpcy.21.
• A flow cytometry-based method for a high-throughput analysis of drug-stabilized topoisomerase II cleavage complexes in human cells. de Campos-Nebel M, Palmitelli M, González-Cid M. Cytometry A. 2016 Sep;89(9):852-60. doi: 10.1002/cyto.a.22919.
• Tyrosyl-DNA-phosphodiesterase I (TDP1) participates in the removal and repair of stabilized-Top2α cleavage complexes in human cells. Borda MA, Palmitelli M, Verón G, González-Cid M, de Campos Nebel M. Mutat Res. 2015 Nov;781:37-48. doi: 10.1016/j.mrfmmm.2015.09.003.
• Progression of chromosomal damage induced by etoposide in G2 phase in a DNA-PKcs-deficient context. Palmitelli M, de Campos-Nebel M, González-Cid M. Chromosome Res. 2015 Dec;23(4):719-32. doi: 10.1007/s10577-015-9478-4.
• DNA-PKcs-dependent NHEJ pathway supports the progression of topoisomerase II poison-induced chromosome aberrant cells. Elguero ME, de Campos-Nebel M, González-Cid M. Environ Mol Mutagen. 2012 Oct;53(8):608-18. doi: 10.1002/em.21729.
• Topoisomerase II-mediated DNA damage is differently repaired during the cell cycle by non-homologous end joining and homologous recombination. de Campos-Nebel M, Larripa I, González-Cid M. PLoS One. 2010 Sep 2;5(9):e12541. doi: 10.1371/journal.pone.0012541.